Peamine erinevus - HPLC vs HPTLC
Peamine erinevus HPLC ja HPTLC vahel on see, et HPLC võimaldab proovis komponentide kvantitatiivset eraldamist, samas kui HPTLC ei võimalda proovis sisalduvate komponentide kvantitatiivset eraldamist.
Kromatograafia on füüsikaline eraldamismeetod, mida kasutatakse segus sisalduvate komponentide eraldamiseks ja identifitseerimiseks. Nii HPLC kui ka HPTLC on kromatograafilised meetodid. HPLC on kõrgefektiivne vedelikkromatograafia. HPTLC on suure jõudlusega õhekihikromatograafia.
SISU
1. Ülevaade ja peamine erinevus
2. Mis on HPLC
3. Mis on HPTLC
4. Kõrvuti võrdlus - HPLC vs HPTLC tabelina
5. Kokkuvõte
Mis on HPLC?
HPLC on kõrgefektiivne vedelikkromatograafia. See on analüüsimeetod, mida kasutatakse segu komponentide eraldamiseks, identifitseerimiseks ja kvantifitseerimiseks. Selles tehnikas lahustatakse proov sobivas lahustis. Seejärel lastakse lahusti koos prooviga läbi antud rõhuga pumba. Pump on täidetud tahke adsorbeeriva materjaliga. Seejärel seonduvad mõned komponendid tugevalt absorbendiga, teised aga lõdvalt. See põhjustab komponentide pumba kaudu erinevat vooluhulka. Seetõttu saab komponente hõlpsasti eraldada.
Joonis 01: HPLC süsteem
Pumpa täitev adsorbent on tuntud kui statsionaarne faas. Lahustunud prooviga lahustit tuntakse liikuva faasina. Selles tehnikas kasutatavat pumpa nimetatakse veerguks. Kolonn täidetakse adsorbeeriva materjaliga, kõige sagedamini ränidioksiidi osakestega. Nende osakeste suurus võib olla vahemikus 2-50 μm. Eraldusprotsessi mõjutab liikuva faasi koostis ja süsteemi temperatuur. Statsionaarse faasi ja proovis sisalduva komponendi koostoimed võivad olla hüdrofoobsed interaktsioonid, dipool-dipool interaktsioonid, ioonsed sidemed jne.
HPLC töörõhk on tunduvalt kõrgem kui traditsioonilises vedelikkromatograafias. See on umbes 50-350 baari. Vedelikukromatograafia ja HPLC erinevus seisneb selles, et vedelikkromatograafias langeb proov raskusjõu kaudu läbi kolonni, samas kui HPLC korral survestatakse proov läbi kolonni. Kolonni suurus ja absorbeerivad osakesed on ka traditsioonilise vedelikkromatograafiaga võrreldes väga väikesed. Kuid HPLC tehnikaga antud eraldusvõime on parem.
Mis on HPTLC?
HPTLC on suure jõudlusega õhekihikromatograafia. See on traditsioonilise TLC täiustatud ja automatiseeritud vorm. See tehnika tagab tõhusa eraldusvõime lühikese aja jooksul. Selles analüüsimeetodis saab valimi ja viidet analüüsida üheaegselt, mis võimaldab valimit võrdlusega võrrelda. See annab parema analüütilise täpsuse kui muud kromatograafilised meetodid. Analüüsiks kuluv aeg on väiksem. Tehnikaks on odav tehnika.
Joonis 02: toiduvärvide analüüs HPTLC abil
HPTLC meetod on lihtne protsess ja proovi ettevalmistamise etapp on samuti välistatud (traditsioonilises TLC-s lisatakse proovide ettevalmistamise etapp enne eraldamist. See etapp hõlmab puhastamist ja rikastamist). Lahustit saab kasutada otse ilma eeltöötluseta, ehkki muud kromatograafilised meetodid nõuavad eeltöötlust, nagu degaseerimine, filtreerimine jne.
HPTLC-s kasutatud adsorbendimaterjal on väga väikeste osakeste suurusega ränidioksiid. Traditsioonilises TLC-s on ränidioksiidi osakeste suurus 5-20 μm, samas kui HPTLC-s on see 4-8 μm. Proov kantakse aplikaatori abil HPTLC plaadile. See annab ühtse ja ohutu rakenduse. Seejärel asetatakse plaadid liikuva faasiga kambrisse. Kamber peaks olema küllastunud liikuva faasi auruga. Pärast HPTLC protsessi saab tuvastada liikunud laigud. Plaadil olevate laikude tuvastamisel kasutatakse HPTLC tehnikas sobivat UV-piirkonda või joodikambrit.
Mis vahe on HPLC ja HPTLC vahel?
Erinev artikkel keskel enne tabelit
HPLC vs HPTLC |
|
| HPLC on kõrgefektiivne vedelikkromatograafia. | HPTLC on suure jõudlusega õhekihikromatograafia. |
| Tehnika | |
| HPLC korral juhitakse liikuv faas koos lahustiga läbi statsionaarse faasiga täidetud kolonni. | HPTLC-s märgatakse proov TLC-plaadil ja asetatakse liikuvat faasi sisaldavasse kambrisse; siis lastakse proovil liikuda koos liikuva faasiga ülespoole plaati. |
| Mõõtmine | |
| HPLC-s kasutatakse proovis olevate komponentide eraldamiseks kolonni läbivate komponentide voolukiiruste erinevusi. | HPTLC-s kasutatakse proovis sisalduvate komponentide läbitud vahemaade erinevusi proovis olevate komponentide eraldamiseks. |
| Kvantitatiivne eraldamine | |
| HPLC võimaldab proovis komponentide kvantitatiivset eraldamist. | HPTLC ei võimalda proovis komponentide kvantitatiivset eraldamist. |
Kokkuvõte - HPLC vs HPTLC
HPLC ja HPTLC on kaks kromatograafilist tehnikat. Peamine erinevus HPLC ja HPTLC vahel on see, et HPLC võimaldab proovis komponentide kvantitatiivset eraldamist, samas kui HPTLC ei võimalda proovis sisalduvate komponentide kvantitatiivset eraldamist.
