Peamine erinevus - immunotsütokeemia vs immunohistokeemia
Immunotsütokeemia (ICC) ja immunohistokeemia (IHC) on kaks laialdaselt kasutatavat meetodit molekulaardiagnostikas, mis tuvastab ja kinnitab rakkudes esinevate molekulaarsete markerite põhjal nii nakkushaiguste kui ka nakkushaiguste esinemist. Immunotsütokeemia ja immunohistokeemia peamine erinevus on molekul, mida kasutatakse nende meetodite analüüsiprotseduurina. ICC-s kasutatakse primaarseid ja sekundaarseid antikehi, mis on konjugeeritud selliste markeritega nagu fluorestsents, diagnostilisteks määramisteks kasutatakse IHC, monoklonaalseid ja polüklonaalseid antikehi.
SISU
1. Ülevaade ja peamine erinevus
2. Mis on immunotsütokeemia
3. Mis on immunohistokeemia
4. Immunotsütokeemia ja immunohistokeemia sarnasused
5. Kõrvuti võrdlus - immunotsütokeemia vs immunohistokeemia tabelina
6. Kokkuvõte
Mis on immunotsütokeemia (ICC)?
ICC kasutab primaarseid ja sekundaarseid antikehi, mis on seotud markeritega, näiteks fluorestsentsmarkerite või ensüümidega, ning on võimas avastamismeetod märklaudrakkudes leiduvate antigeenide tuvastamiseks, mis võivad olla kas nakkuslikud rakuosakesed või vähkkasvajarakud. Immunotsütokeemia jaoks on vaja kolme tüüpi kontrolle.
- Primaarne antikeha - kontroll, mis näitab antigeeniga seonduva primaarse antikeha spetsiifilisust
- Sekundaarne antikeha - kontroll, mis näitab, et märgis on spetsiifiline primaarse antikeha suhtes
- Sildi juhtnupud - näitavad, et märgistus on lisatud sildi tulemus, mitte endogeense märgistuse tulemus.
Joonis 01: Immunotsütokeemia märgistab rakkudes olevaid üksikuid valke (siin on sümpaatiliste autonoomsete neuronite aksonites olev türosiini hüdroksülaas roheliselt näidatud).
Esmane antikehakontroll on spetsiifiline iga uue antikeha suhtes ja seda ei saa iga katse puhul korrata. Sekundaarse antikeha kontroll konstrueeritakse katses kasutatud primaarse antikeha põhjal ja see lisatakse iga katse juurde. Märgistamise kontroll on kaasatud, kui muudetakse protseduuri tingimust, muudetakse proovi või kui avastatakse ootamatu märgistus.
ICC kaks peamist rakendust on raadioimmunotest (RIA) ja ensüümidega seotud immunosorbentanalüüs (ELISA). Kõige tavalisem kasutatud antikeha on immunoglobuliin G.
Mis on immunohistokeemia (IHC)?
Immunohistokeemias sisaldab lähteproov monoklonaalseid ja polüklonaalseid antikehi, et määrata antigeenide olemasolu võõrastes rakkudes. See meetod põhineb antigeeni ja antikeha seondumise spetsiifilisel reaktsioonil. Avastamiseks kasutatud antikehi saab märgistada erinevate markeritega; need võivad olla fluorestsentsmarkerid, radiomärgistatud markerid või keemilised markerid. Antigeeni ja suunatud antikeha vahelise in vitro seondumise hõlbustamise kaudu saab kindlaks teha raku konkreetse valgu olemasolu või puudumise.
Joonis 02: normaalse neeru immunohistokeemiline värvimine CD10-ga
Praegu tegelevad teadlased rakkudes leiduvate spetsiifiliste antigeenide sihtantikehade väljatöötamisega, mis võivad areneda kas pahaloomuliste kasvajarakkudena või antigeenidena, mis esinevad nakkusohtlikes ainetes nagu HIV.
Millised on immunotsütokeemia ja immunohistokeemia sarnasused?
- Reaktsioonid on ICC-s ja IHC-s väga spetsiifilised ja täpsed.
- ICC ja IHC rakendused hõlmavad vähi ja nakkushaiguste diagnostikat.
- Steriilsed tingimused tuleks säilitada mõlemas olukorras ja need tuleks läbi viia in vitro
- Mõlemad meetodid annavad reprodutseeritavaid tulemusi.
- Mõlemad on kiired.
- Nii ICC-s kui ka IHC-s kasutatakse tuvastamismeetoditena raadiosildistamist, fluorestsentstehnikat.
- Mõlemad põhinevad antigeeni ja antikeha paaristamisel.
Mis vahe on immunotsütokeemia ja immunohistokeemia vahel?
Erinev artikkel keskel enne tabelit
Immunotsütokeemia (ICC) vs immunohistokeemia (IHC) |
|
| ICC kasutab primaarseid ja sekundaarseid antikehadega seotud markereid, näiteks fluorestsentsmarkereid või ensüüme, ning on võimas detekteerimismeetod märklaudrakkudes leiduvate antigeenide tuvastamiseks. | IHC on meetod, mis kasutab monoklonaalseid ja polüklonaalseid antikehi, et määrata antigeenide olemasolu, mis on rakupindadele asetatud spetsiaalsed valgumarkerid. |
| Proovi allikas | |
| ICC-s kasutatakse histoloogiliselt õhukesteks osadeks töödeldud kudedest saadud proove. | IHC kasutab proovid, mis koosnevad monokihis kasvatatud rakkudest või suspensioonil sadestunud rakkudest. |
| Proovi töötlemine | |
| ICC-s peaksid rakud olema läbilaskvad, et hõlbustada antikehade tungimist rakusisestesse sihtmärkidesse. | IHC-s on rakud enne värvimist formaliiniga fikseeritud, parafiiniga kinnitatud. |
Kokkuvõte - immunotsütokeemia vs immunohistokeemia
Molekulaarset diagnostikat kasutatakse rakkudes esinevate molekulaarsete markerite põhjal nii nakkushaiguste kui ka nakkushaiguste esinemise tuvastamiseks ja kinnitamiseks. Molekulaarsed markerid võivad olla valgud või DNA või RNA järjestused; selliste tehnoloogiate nagu ICC ja IHC väljatöötamine on sillutanud teed teadlastele haiguse ja selle põhjuste varases staadiumis tuvastamiseks. Nii ICC kui IHC sõltuvad antikeha ja antigeeni vahelistest spetsiifilistest reaktsioonidest, ehkki proovi allikas. Peamine erinevus immunotsütokeemia ja immunohistokeemia vahel on kahe protseduuri proovide töötlemine.
Laadige alla immunotsütokeemia ja immunohistokeemia PDF-i versioon
Selle artikli PDF-versiooni saate alla laadida ja kasutada võrguühenduseta eesmärkidel, nagu tsiteeritud. Laadige siit alla PDF-versioon. Erinevus immunotsütokeemia ja immunohistokeemia vahel.
