Peamine erinevus - CFU vs MPN
Kolooniaid moodustav üksus (CFU) ja kõige tõenäolisem arv (MPN) on kaks meetodit, mida kasutatakse mikroorganismide loendamiseks proovides. Mõlemat parameetrit kasutatakse veeproovides veekvaliteedi ja fekaalide indikaatorbakterite tuvastamiseks. Kolooniaid moodustav üksus on mõõt, mida kasutatakse elujõuliste bakterirakkude või seenrakkude arvu loendamiseks antud proovi konkreetses mahus või kaalus. Selle parameetri standardühik on CFU / ml või CFU / g. Kõige tõenäolisem arv on teine üksus, mida kasutatakse vedelate proovide elujõuliste bakterirakkude arvu mõõtmiseks. Peamine erinevus CFU ja MPN vahel on see, et CFU arvutatakse tahkel agarplaadil kasvavate bakteri- ja seenekolooniate põhjal, MPN aga vedelas keskkonnas kasvavate elujõuliste bakterite põhjal.
SISU
1. Ülevaade ja peamine erinevus
2. Mis on CFU
3. Mis on MPN
4. Kõrvuti võrdlus - CFU vs MPN tabelina
5. Kokkuvõte
Mis on CFU?
Kolooniaid moodustav üksus (CFU) on parameeter, mis mõõdab elujõuliste bakteri- või seenrakkude arvu antud proovis. Kolooniaid moodustavate üksuste loendamise meetodit nimetatakse standardplaatide loenduseks. Elujõulised kolooniad, mis ilmuvad agarplaatidele, väljendatakse CFU-dena 1 ml (kolooniaid moodustav ühik milliliitris) vedeliku proovis või CFU 1 g (kolooniaid moodustav üksus ühe grammi kohta) tahke aine proovi kohta.
CFU mõõtmiseks proovis kasutatakse kahte levinumat meetodit. Need on hajutatud plaadi ja valamisplaadi meetod. Neid kahte meetodit toetab tehnika, mida nimetatakse seerialahjenduseks. Seeriaviisiliselt lahjendatud proovid võimaldavad saada agari pinnal loendamatu arvu kolooniaid. Tuntud koguse proovi võib levitada agarplaadi pinnale või segada agariga ja valada plaadile. Seejärel inkubeeritakse plaati ja loendatakse tekkinud kolooniad. Kolooniate arv on seotud mikroorganismide arvuga algses proovis. Plaate, millel on liiga palju kolooniaid või liiga vähe, ei võeta arvesse, kuna tulemused ei pruugi nendel plaatidel olla statistiliselt täpsed. Statistiliselt on parim vahemik 30 - 300 kolooniat agarplaadil. Seega tuleks täpse loendamise jaoks valida õiged plaadid. Eespool nimetatud funktsiooni jaoks tehakse järjestikune lahjendus.
Kui loete plaatide elujõuliste kolooniate arvu, saab CFU / ml arvutada järgmise võrrandi abil.
CFU algproovi milliliitri kohta = kolooniate arv plaadil X lahjendustegur
Lahjendustegur = (1 / plaadi lahjendus)
Näiteks kui 10–4 lahjendusega plaadil on 149 kolooniat, saab bakterite arvu 1 ml algproovis arvutada järgmiselt:
CFU / ml = (149) x (1/10 -4)
= 149 x 10 4 või 1490000
= 1,49 x 106
Joonis 01: kolooniaid moodustav üksus
Mis on MPN?
Kõige tõenäolisem arv on CFU / ml-le alternatiivne näitaja. MPN hindab ka vedelas proovis olevaid elujõulisi rakke. See loeb vedelas kultuuris kasvavaid organisme ja on valdavalt bakterioloogiline tehnika. See meetod on eriti kasulik proovide jaoks, mis sisaldavad väikseid bakterirakkude kontsentratsioone; näiteks piim, joogivesi jne. MPN väärtust väljendatakse 100 ml mahu kohta. MPN tugineb tõenäosusteoorial põhineval statistilisel meetodil. MPN väärtuste leidmiseks 100 ml proovi kohta on loodud statistilised tabelid. Need tabelid näitavad tulemusi 95% usalduspiiride juures.
MPN väärtus arvutatakse pärast tehnikat, mida nimetatakse mitme toruga kääritamismeetodiks. Kolme katsekomplekti, mis sisaldavad sobivat söötet, inokuleeritakse kolme erineva koguse prooviga, näiteks 10 ml, 1 ml ja 0,1 ml, ning inkubeeritakse kasvu jaoks. Pärast inkubatsiooniperioodi hinnatakse katseklaasid kasvu olemasolu või puudumise korral + (positiivne) või - (negatiivne). Seejärel võrreldakse mikroorganismide arvu hindamiseks positiivsete ja negatiivsete tulemuste mustrit statistiliste tõenäosuste MPN-tabeliga. Seejärel antakse 100 ml proovile MPN väärtus. MPN-i kasutatakse laialdaselt veeproovides leiduvate kolibakterite tuvastamiseks.
Joonis 02: MPN tabel
Mis vahe on CFU-l ja MPN-l?
Erinev artikkel keskel enne tabelit
CFU vs MPN |
|
| CFU on mõõdik, mida kasutatakse antud proovis elujõuliste bakteri- või seenekolooniate arvu väljendamiseks. | MPN on CFU-le alternatiivne näitaja ja mõõdab elujõuliste bakterirakkude arvu vedelas proovis. |
| Ühik | |
| CFU / ml või CFU / g | MPN / 100 ml |
| Arvutus | |
| CFU arvutatakse agarplaatidel kasvatatud kolooniate arvu loendamise teel. | MPN arvutamiseks võrreldi torude positiivseid ja negatiivseid mustreid MPN statistilise tabeliga. |
| Järjestikune lahjendamise tehnika | |
| Enne proovide asetamist agarplaatidele viiakse läbi järjestikune lahjendamine. | Seerialahjendamist MPN arvutamisel tavaliselt ei tehta |
| Meetodid | |
| Laotusplaadi meetod ja valamisplaadi meetod on CFU saamiseks kahte tüüpi meetodid. | MPN-väärtuse saamiseks kasutatakse meetodit mitme toruga kääritamiseks. |
Kokkuvõte - CFU vs MPN
Mikroobide kasvu mõõtmine on vajalik mitmel põhjusel. Toidutöötlemisettevõtetes on vaja mõõta mikroorganismide taset ja tüüpi toidus. Toiduainetööstuses ja meditsiinis on vaja tagada steriliseerimisravi tõhus rakendamine. Reoveepuhastites on vajalik mikroobide loendamine regulaarselt. Protseduuri optimeerimisel molekulaarbioloogias on vaja mõõta kolooniate arvu plaatidel. Seega on saadaval erinevad loendamise ja kasvu mõõtmise meetodid. CFU ja MPN on kaks sellist meetodit, mida kasutatakse laialdaselt erinevates valdkondades. CFU on antud proovis olevate elujõuliste bakteri- ja seenekolooniate arvu mõõt. Selle arvutamiseks kasutatakse standardset plaatide loendamise meetodit või elujõulist plaatide loendamise meetodit. MPN on veel üks näitaja, mis väljendab vedelas proovis antud mahus olevate bakterirakkude arvu. Selle arvutamiseks kasutatakse mitme toruga kääritamise meetodit ja MPN-tabelit. See on CFU ja MPN erinevus.
Laadige alla CFU vs MPN PDF-versioon
Selle artikli PDF-versiooni saate alla laadida ja kasutada võrguühenduseta eesmärkidel, nagu viidatud märkustele. Laadige siit alla PDF-versioon CFU ja MPN erinevus.
