Peamine erinevus - HPLC vs LCMS
Enne HPLC ja LCMS erinevuse analüüsimist vaatleme kõigepealt HPLC ja LCMS tähendust. Kromatograafia on keemilise analüüsi lahutamistehnika, kus proovi koostisosad eraldatakse kromatograafilise keskkonna kaudu läbimisel. See hõlmab ka suhtlemist prooviga, statsionaarset faasi ja liikuvat faasi. HPLC tähistab kõrgefektiivset vedelikkromatograafiat ja seda kasutatakse analüütilises keemias vedelikkromatograafia meetodina. Valitud biomolekulide kvantitatiivseks analüüsiks on välja töötatud vedelkromatograafia ja massispektroskoopia (LCMS) kombinatsioon ning see on HPLC-ga võrreldes väga tundlik, täpne ja spetsiifiline analüüsiprotseduur. See on peamine erinevus HPLC ja LCMC vahel. Selles artiklis tutvustatakse teile HPLC ja LCMC, mis tegelevad keemilise analüüsiga ja arutavad erinevusi HPLC ja LCMS vahel.
Mis on HPLC?
Kõrgefektiivne vedelikkromatograafia (HPLC) on analüütilises keemias populaarne eraldustehnika. Seda kasutatakse peamiselt komponentide eraldamiseks, iga segus oleva komponendi identifitseerimiseks ja kvantifitseerimiseks. Varem oli see meetod tuntud kui kõrgsurvevedelikkromatograafia, kuna see sõltus pumbadest proovisegu sisaldava rõhu all oleva vedela lahusti voolamiseks läbi tahke adsorbeeriva materjaliga pakitud kolonni. Iga proovisegu koostisosa suhtleb tahke adsorbendi materjaliga erinevalt, mille tulemuseks on erinevate koostisosade jaoks erinev voolukiirus. See võib viia koostisosade eraldumiseni, kui nad voolavad välja HPLC kolonnist.
HPLC-d on kasutatud mitmesuguste rakenduste jaoks, näiteks D-vitamiini taseme analüüsimiseks veres, sportlaste ebaseaduslikuks uimastitarbimiseks, tuvastades nende uriinis olevad ravimijäägid, sorteerides uurimistööks välja kompleksse bioloogilise proovi koostisosad ning analüüsides ja valmistades ravimeid.
Mis on LCMS?
Vedelikkromatograafia – massispektromeetria (LCMS) on analüütiline tehnika, mis ühendab vedelikkromatograafia füüsikalise eraldumise võimed massispektromeetria (MS) massianalüüsi võimekusega. Vedelikkromatograafia on eraldustehnika ja laetud osakeste massi-laengu suhte analüüsimiseks kasutatakse massispektromeetriat. Füüsiline eraldamine saavutatakse tavaliselt HPLC abil ja alternatiivina LCMS-i, tuntud ka kui HPLC-MS. LCMS on domineeriv analüüsimeetod, millel on HPLC-ga võrreldes väga suur täpsus, tundlikkus ja spetsiifilisus. Seega on see kasulik paljudes rakendustes, näiteks uurimisotstarbel, ravimianalüüsil, toiduanalüüsil jne. LCMS-i kasutatakse peamiselt konkreetse proovi biokeemiliste omaduste eraldamiseks, tuvastamiseks, tuvastamiseks ja kvantifitseerimiseks keerukate keemiliste segude juuresolekul.
Mis vahe on HPLC ja LCMC vahel?
HPLC ja LCMC lühend ja määratlus
HPLC: HPLC tähistab suure jõudlusega vedelikkromatograafiat. See on eraldamistehnika, mida kasutatakse peamiselt komponentide eraldamiseks, segus iga komponendi identifitseerimiseks ja kvantifitseerimiseks.
LCMS: LCMS tähistab vedelikkromatograafiat ja massispektromeetriat. See on analüütiline tehnika, mis ühendab vedelikkromatograafia füüsikalised eraldusvõimed massispektromeetria (MS) massianalüüsi võimetega.
HPLC ja LCMC omadused
Klassifikatsioon
HPLC: see on ainult vedelkromatograafia meetod.
LCMS: see on vedelkromatograafia meetodi ja massispektromeetria meetodi kombinatsioon.
Tõhusus
HPLC: võrreldes LCMS-iga on HPLC analüüs vähem efektiivne ja aeglasem.
LCMS: võrreldes HPLC-ga on LCMS-analüüs tõhus ja kiirem.
Tundlikkus
HPLC: võrreldes LCMS-iga on HPLC analüüs vähem tundlik.
LCMS: võrreldes HPLC-ga on LCMS analüüs tundlikum.
Konkreetsus
HPLC: võrreldes LCMS-iga on HPLC analüüs vähem spetsiifiline.
LCMS: võrreldes HPLC-ga on LCMS analüüs spetsiifilisem.
Täpsus
HPLC: HPLC annab mõne kemikaali määramiseks vähem täpseid tulemusi kui LCMS.
LCMS: LCMS annab mõne kemikaali määramiseks täpsemaid tulemusi kui HPLC.
Komponent
HPLC: HPLC-d võib pidada LCMS-i komponendiks.
LCMS: LCMS-i ei saa pidada HPLC komponendiks.
Iooniallikas
HPLC: iooniallikat HPLC-seadmes ei eksisteeri.
LCMS: iooniallikas on olemas LCMS-seadmes.
Rakendused
HPLC: ioone, polümeere, orgaanilisi molekule ja biomolekule saab analüüsida HPLC abil.
LCMS: saab analüüsida orgaanilisi molekule ja biomolekule. Vastupidiselt HPLC-le võib LCMS-i kasutada mittetäielikult lahustatud segude uurimiseks.
Operatsioon
HPLC: HPLC instrumendi skeem on toodud joonisel 1 ja see sisaldab tavaliselt automaatproovi, pumbasid ja detektorit. Proovivõtja sisestab proovisegu liikuvasse faasi (lahustite nagu vesi, atsetonitriil ja / või metanool survestatud segu), mis viib selle kolonni. Pumbad annavad kolonni kaudu soovitud liikuva faasi voolu ja koostise. Kolonn täidetakse adsorbendiga, mis on teraline tahke osake, näiteks ränidioksiid või polümeerid. Detektor tekitab signaali, mis on proportsionaalne proovikomponentide olemasoluga veerus, võimaldades seeläbi valitud proovi komponentide kvantifitseeritavat analüüsi. HPLC-seadet juhitakse ja andmete analüüsi võimaldavad digitaalne mikroprotsessor ja kasutaja tarkvara.
Joonis 1: HPLC instrumendi skeem
LCMS: LCMS-seadme skeem on toodud joonisel 2. Prooviekstrakt sisestatakse kolonni, mis koosneb HPLC-st. Selles veerus säilitatakse füüsikaliste tunnuste põhjal proovimetaboliidid ja erinevad metaboliidid voolavad massispektromeetrisse erineva ajaintervalliga. Massispektroskoopiat kasutatakse osakeste masside hindamiseks, molekuli elementide paigutuse määramiseks ja molekuli struktuuride selgitamiseks. Proov tuleks laetud molekulide tekitamiseks ioniseerida, et määrata nende massi ja laengu suhe. Seetõttu koosneb LCMS HPLC-instrumentide asemel kolmest lisamoodulist, näiteks rauaallikast, massianalüsaatorist ja detektorist. Iooniallikas võib gaasifaasi proovi muuta ioonideks ja massianalüsaatoriks, mis rühmitab ioonid nende masside järgi elektromagnetväljade abil. Lõpuksdetektor kvantifitseerib iga proovis sisalduva iooni väärtused ja edastab andmed. LCMS-tehnikat saab kasutada nii kvalitatiivsete kui ka kvantitatiivsete rakenduste jaoks.
Joonis 2: LCMS-seadme skeem
Kokkuvõtteks võib öelda, et HPLC on vedelikkromatograafia meetod, samas kui LCMS on vedelikkromatograafia ja massispektromeetria kombinatsioon. Mõlemal analüüsimeetodil on erinevad omadused, kuid neid saab kasutada toidukompositsioonide, ravimite ja muude bioaktiivsete molekulide tuvastamiseks ja kvantifitseerimiseks.
