Peamine erinevus - grammi plekk vs kiire happe
Bakterid on väga väikesed mikroorganismid. Need on läbipaistvad ja nende tuvastamine on elu- ja värvimata tingimustes keeruline. Seega töötatakse bakterite avastamise hõlbustamiseks välja erinevad värvimismeetodid. Värvimistehnikaid on kolm peamist tüüpi: lihtne värvimine, diferentsiaalvärvimine ja struktuurne värvimine. Diferentsiaalvärvimine on tehnika, mis kasutab bakterite eristamiseks rohkem kui ühte plekki. Grammiplekk ja happekindel plekk on rahva seas tuntud kui diferentsiplekid. Grammvärvimine on diferentseeritud värvimistehnika, mis eraldab bakterid kahte rühma, mida nimetatakse grampositiivseteks ja gramnegatiivseteks bakteriteks. Happekindel plekk on diferentsiaalvärv, mida kasutatakse happekindlate organismide, näiteks Mycobacterium, tuvastamiseks mittehappelistest kiiretest organismidest. See on peamine erinevus Grami ja Acid Fast plekide vahel.
SISU
1. Ülevaade ja põhierinevus
2. Mis on grammvärv
3. Mis on happekiiresti
4. Grammipleki ja happekiire sarnasused
5. Kõrvuti võrdlus - grammisvärv vs happekiire tabelina
6. Kokkuvõte
Mis on grammi plekk?
Grammiplekk on oluline diferentseeritud värvimistehnika, mida kasutatakse bakterite tuvastamiseks mikrobioloogias. Selle tehnika võttis kasutusele Taani bakterioloog Hans Christian Gram 1884. aastal. Grammiga värvimine kategoriseerib bakterid kahte suurde rühma, nimega grampositiivsed ja gramnegatiivsed, mis on bakterite klassifitseerimisel ja identifitseerimisel väga olulised. Mikrobioloogid viivad oma uuringute käigus bakterite iseloomustamise esimese sammuna läbi grammi värvimise.
Bakterid rühmitatakse nende rakuseina erinevuste põhjal. Grampositiivsed bakterid koosnevad nende rakuseina paksest peptidoglükaanikihist, gramnegatiivsed bakterid aga nende rakuseinas olevast õhukesest peptidoglükaanikihist. Grammiga värvimise tulemus põhineb rakuseina peptidoglükaanikihi paksuse erinevusel.
Grammide värvimine viiakse läbi nelja erineva reagendi abil; esmane plekk, peits, värvimist eemaldav aine ja vasteplekk. Primaar- ja vasteplekkidena kasutatakse vastavalt kristallvioletti ja safraniini, peitsina ja värvivärvina kasutatakse vastavalt grammi joodi ja 95% alkoholi. Grammide värvimise põhietapid on järgmised;
- Puhta klaasist slaidil valmistatakse bakteriaalne määrimine, fikseeritakse ja jahutatakse.
- Määrimist ujutatakse kristallvioletsega 1 - 2 minutit.
- Üleliigsete plekkide eemaldamiseks loputatakse määrdumist aeglaselt jooksva kraaniveega.
- 1 minuti jooksul kantakse määrdele grammi joodi.
- Määrdumist loputatakse aeglaselt jooksva kraaniveega
- Määrdumist pestakse 95% alkoholiga 2–5 sekundit ja loputatakse aeglaselt jooksva kraaniveega.
- Määrimist värvitakse safraniiniga 1 minut
- Määrdumist loputatakse aeglaselt jooksva kraaniveega, kuivatatakse ja jälgitakse mikroskoobi all.
Grammipleki lõpus täheldatakse gramnegatiivseid baktereid roosas, grammpositiivseid baktereid aga lillat värvi.
Joonis 01: gramnegatiivsed ja grampositiivsed bakterid
Grammipleki tulemus otsustatakse nende rakuseinas oleva peptidoglükaanikihi paksuse järgi. Värvimisetapi käigus eemaldatakse esmane plekk ja peits gramnegatiivsetelt bakteritelt ning muutuvad värvituks, kuna neil on õhuke peptidoglükaanikiht. Esmane plekk jääb grampositiivsetesse bakteritesse, kuna neil on paks peptidoglükaanikiht. Vasteplekk ei ole grampositiivsete bakterite jaoks efektiivne, kuna primaarne plekk jääb alles. Seega on grammi positiivsed bakterid nähtavad primaarses värvitoonis, see tähendab lillat värvi. Vasteplekk värvib gramnegatiivseid baktereid ja need on nähtavad valiku värviga, mis on safraniini värv. Seega on baktereid lihtne grammi värvimise järgi kahte rühma liigitada ning see on bakterite diferentseerimisel ja identifitseerimisel väärtuslik.
Mis on happekiire?
Happekindlus on teatud bakterite füüsikaline omadus, täpsemalt nende vastupidavus värvimisprotseduuride käigus hapete poolt värvimuutustele. Pärast värvimist takistavad need organismid lahjendatud happe- ja / või etanoolipõhiseid värvimisprotseduure, mis on levinud paljudes värvimisprotokollides. Seega antakse neile organismidele nimi „happeline kiiresti”. See omadus on näidatud tänu sellele, et nende rakuseintes on kõrge vahajas materjal (mükoolhapped). See test on Mycobacterium tuberculosis'e tuvastamiseks kriitilise tähtsusega.
Joonis 2: Happelised kiired mükobakterid
Selle happekiire pleki töötas välja Paul Ehrlich 1882. Ehrlichi happekiiret tehnikat muutis Ziehl-Neelsen ja nüüd kasutatakse seda sagedamini. Happega kiire värvimise protseduur hõlmab kolme erinevat reagenti. Esmase plekina kasutatakse karboolfuschini. Värvainetena kasutatakse happelist alkoholi. Vastlakina kasutatakse metüleensinist. Värvimisprotseduur viiakse läbi järgmiselt.
- Esmane plekk (karboolfutsiin) kantakse slaidil olevale fikseeritud proovile (kõik rakud värvitakse punase värviga).
- Klaasi kuumutatakse aurutades 5 minutit, mis ajab plekid korralikult rakkudesse.
- Seejärel lisatakse värviv lahus (see eemaldab punase värvi kõigist rakkudest, välja arvatud happekindlad bakterid).
- Lisaplekiks lisatakse metüleensinine (see värvib kõik värvunud bakterirakud).
- Happekiired bakterid jäävad punaseks, samas kui happelised kiired bakterid värvuvad sinisena.
Millised on grammafitsiidi ja happekiire sarnasused?
- Grammvärv ja happekiire on kaks diferentseeritud värvimistehnikat.
- Mõlemad meetodid liigitavad bakterid kahte rühma.
- Mõlemas tehnikas kasutatakse kahte plekki ja ühte värvitust.
Mis vahe on gramiplekil ja kiirel happel?
Erinev artikkel keskel enne tabelit
Grammiplekk vs Hape kiiresti |
|
Grammiga värvimine on diferentseeritud värvimistehnika, mis eraldab bakterid kahte gruppi gram-positiivseid ja gram-negatiivseid baktereid. | Acid Fast plekk on diferentsiaalne plekk, mida kasutatakse happekindlate organismide tuvastamiseks mittehappekindlatest organismidest. |
Esmane plekk | |
Kristallviolet on grammvärvimisel tavaliselt kasutatav primaarne plekk. | Karboolfutsiin on peamine happekiiruses kasutatav plekk. |
Värvaine | |
Värvimisainetena kasutatakse grammi värvimisel 95% alkoholi. | Happelist alkoholi kasutatakse kiiresti värvainet eemaldava ainena. |
Vastuplekk | |
Grammiplekk kasutab vasteplekina safraniini. | Happekiirel plekil kasutatakse vastumärgina metüleensinist. |
Vaatlus | |
Gramnegatiivseid baktereid täheldatakse värvivalikus ja grampositiivseid baktereid lillakas värvuses. | Acid Fast bakterid on täheldatud punases ja mittehappelised bakterid sinises. |
Kokkuvõte - Grammiplekk vs Happeline kiiresti
Mikroorganismide visualiseerimine elus olekus on keeruline. Seetõttu kasutatakse nende omaduste uurimiseks ulatuslikult bioloogilisi plekke ja värvimisprotseduure. Diferentsiaalvärvimine on bakterite eristamiseks üks värvimistehnika liik. Gramm- ja happekiire värvimine on kaks erinevat värvimistehnikat. Grammvärvimine eristab gramnegatiivseid ja gram-positiivseid baktereid nende rakuseinte paksuse põhjal. Happekiire värvimine eristab happekindlaid baktereid mittehappekindlatest bakteritest rakuseina mükoolhappesisalduse põhjal. See on erinevus happekindla ja grammi värvimise vahel.
Laadige alla PDF-versioon grammi plekist vs happest kiiresti
Selle artikli PDF-versiooni saate alla laadida ja kasutada võrguühenduseta eesmärkidel, nagu tsiteeritud. Laadige siit alla PDF-versioon. Grammipleki ja happekiiruse erinevus.