Voolutsütomeetria Ja FACS-i Erinevus

2024 Autor: Mildred Bawerman | [email protected]. Viimati modifitseeritud: 2023-12-16 08:38

Peamine erinevus - voolutsütomeetria vs FACS

Rakuteooria kontekstis on rakud kõigi elusorganismide põhiline struktuuriline ja funktsionaalne üksus. Rakkude sortimine on metoodika, mida kasutatakse erinevate rakkude eraldamiseks vastavalt füsioloogilistele ja morfoloogilistele tunnustele. Neil võib olla rakusiseseid või rakuväliseid omadusi. DNA, RNA ja valkude interaktsiooni peetakse rakusisesteks interaktiivseteks omadusteks, samas kui kuju, suurust ja erinevaid pinnavalke peetakse rakuvälisteks omadusteks. Tänapäeva teaduses on rakkude sorteerimise metoodikad aidanud kaasa erinevate uuringute läbiviimisele bioloogilistes uuringutes ja ka uute põhimõtete kehtestamisele meditsiini uuringute kaudu. Rakkude sorteerimine toimub erinevate metoodikate abil, mis hõlmavad nii primitiivset vähemate seadmetega kui ka arenenud tehnoloogilisi metoodikaid, kasutades keerukaid masinaid. Voolutsütomeetria, fluorestsentsaktiveeritud rakkude sorteerimine (FACS), rakkude magnetiline valik ja üksikute rakkude sorteerimine on peamised kasutatud metoodikad. Rakkude eristamiseks vastavalt nende optilistele omadustele töötatakse välja voolutsütomeetria ja FACS. FACS on spetsiaalne voolutsütomeetria tüüp. Voolutsütomeetria on metoodika, mida kasutatakse rakkude heterogeense populatsiooni analüüsimisel vastavalt erinevatele rakupinna molekulidele, suurusele ja mahule, mis võimaldab uurida üksikuid rakke. FACS on protsess, mille käigus rakkude proovisegu sorteeritakse vastavalt nende valguse hajumise ja fluorestsentsi omadustele kahte või enamasse anumasse. See on peamine erinevus voolutsütomeetria ja FACS-i vahel.

SISU

1. Ülevaade ja peamine erinevus

2. Mis on voolutsütomeetria

3. Mis on FACS

4. Voolutsütomeetria ja FACS-i sarnasused

5. Võrdlus kõrvuti - voolutsütomeetria vs FACS tabelina

6. Kokkuvõte

Mis on voolutsütomeetria?

Voolutsütomeetria on meetod, mida kasutatakse rakusiseste molekulide ja rakupinna ekspressiooni uurimiseks ja määramiseks ning erinevate rakutüüpide määratlemiseks ja iseloomustamiseks. Seda kasutatakse ka raku mahu ja suuruse määramiseks ning eraldatud alampopulatsioonide puhtuse hindamiseks. See võimaldab üksikute lahtrite mitme parameetriga hindamist umbes samal ajal. Voolutsütomeetriat kasutatakse fluorestsentsmärgistatud antikehade tõttu tekkiva fluorestsentsi intensiivsuse mõõtmiseks, mis aitavad tuvastada seotud rakkudega seonduvaid valke või ligandeid.

Joonis 01: Voolutsütomeetria

Üldiselt hõlmab voolutsütomeetria peamiselt kolme alamsüsteemi. Need on voolikud, elektroonika ja optika. Voolutsütomeetrias on saadaval viis põhikomponenti, mida kasutatakse rakkude sorteerimisel. Need on vooluelemendid (vedelike voog, mida kasutatakse nende transportimiseks ja rakkude joondamiseks optilise tajumise protsessiks), mõõtesüsteem (võib olla erinev süsteem, sealhulgas elavhõbeda- ja ksenoonlambid, suure võimsusega vesijahutusega või väikese võimsusega õhkjahutusega laserid või dioodlaserid), ADC; Analoog-digitaalmuundur süsteem, võimendussüsteem ja arvuti analüüsimiseks. Omandamine on protsess, mille käigus proovidelt kogutakse andmeid voolutsütomeetri abil. Seda protsessi vahendab voolutsütomeetriga ühendatud arvuti. Arvutis olev tarkvara analüüsib voolutsütomeetri abil arvutisse sisestatud teavet. Tarkvaral on võimalus reguleerida ka voolu tsütomeetrit juhtiva katse parameetreid.

Mis on FACS?

Voolutsütomeetria kontekstis on fluorestsentsiga aktiveeritud rakkude sorteerimine (FACS) meetod, mida kasutatakse bioloogiliste rakkude segu proovi diferentseerimisel ja sorteerimisel. Rakud eraldatakse kahest või enamast anumast. Sorteerimismeetod põhineb raku füüsikalistel omadustel, mis hõlmavad raku valguse hajumist ja fluorestsentsi omadusi. See on oluline teaduslik tehnika, mida saab kasutada igast rakust eralduvate fluorestsentssignaalide usaldusväärsete kvantitatiivsete ja kvalitatiivsete tulemuste saamiseks. FACSi ajal esialgu eelnevalt saadud rakkude segu; suspensioon suunatakse kiiresti voolava kitsa vedeliku keskele. Vedeliku vool on kavandatud selleks, et lahtrites olevad rakud eraldataks iga kambri läbimõõdu alusel. Suspensioonivoolule rakendatakse vibratsioonimehhanismi, mille tulemusena moodustuvad üksikud tilgad.

Joonis 02: FACS

Süsteem on kalibreeritud, et luua üks tilk ühe lahtriga. Vahetult enne tilkade moodustumist liigub voolususpensioon mööda fluorestsentsi mõõteseadet, mis tuvastab igale rakule iseloomuliku fluorestsentsi. Tilkade tekkimise kohas asetatakse elektriline laadimisrõngas, mis enne fluorestsentsi intensiivsuse mõõtmist indutseeritakse ringile laeng. Kui tilgad on suspensioonivoolust moodustunud, jääb tilkade vahele kinni laeng, mis seejärel siseneb elektrostaatilisse läbipaindesüsteemi. Vastavalt laengule suunab süsteem tilgad erinevatesse mahutitesse. Laengu rakendamise meetod varieerub vastavalt FACSis kasutatavatele erinevatele süsteemidele. FACSis kasutatavaid seadmeid tuntakse fluorestsentsiga aktiveeritud raku sorteerijana.

Milline on voolutsütomeetria ja FACSi sarnasus?

Rakkude diferentseerimiseks vastavalt nende optilistele omadustele töötatakse välja voolutsütomeetria ja FACS

Mis vahe on voolutsütomeetria ja FACS-i vahel?

Erinev artikkel keskel enne tabelit

Voolutsütomeetria vs FACS
Voolutsütomeetria on metoodika, mida kasutatakse rakkude heterogeense populatsiooni analüüsimisel vastavalt erinevatele rakupinna molekulidele, suurusele ja mahule, mis võimaldab uurida üksikuid rakke.	FACS on protsess, mille käigus rakkude proovisegu sorteeritakse vastavalt nende valguse hajumise ja fluorestsentsi omadustele kahte või enamasse anumasse.

Kokkuvõte - voolutsütomeetria vs FACS

Rakk on kõigi elusorganismide põhiline struktuuriline ja funktsionaalne üksus. Rakkude sorteerimine on protsess, mille käigus rakud eraldatakse ja diferentseeritakse rakkudesiseste ja rakuväliste omaduste põhjal erinevatesse kategooriatesse. Voolutsütomeetria ja FACS on rakkude sortimisel kaks olulist metoodikat. Mõlemad protsessid on välja töötatud rakkude eristamiseks vastavalt nende optilistele omadustele. Voolutsütomeetria on metoodika, mida kasutatakse rakkude heterogeense populatsiooni analüüsimisel vastavalt erinevatele rakupinna molekulidele, suurusele ja mahule, mis võimaldab uurida üksikuid rakke. FACS on protsess, mille käigus rakkude proovisegu sorteeritakse vastavalt nende valguse hajumise ja fluorestsentsi omadustele kahte või enamasse anumasse. See on erinevus voolutsütomeetria ja FACS-i vahel.

Laadige alla voolutsütomeetria vs FACS PDF-versioon

Selle artikli PDF-versiooni saate alla laadida ja kasutada võrguühenduseta eesmärkidel, nagu tsiteeritud. Laadige siit alla PDF-versioon. Voolutsütomeetria ja FACS-i erinevus