Peamine erinevus - RPMI vs DMEM
Enamik uuringuid hõlmab loomarakkude kultiveerimist ja seega vajavad need uuringud loomsete rakuliinide säilitamist erilistes kasvutingimustes. Loomarakkude kultiveerimine toimub farmakoloogiliste uuringute käigus laialdaselt ravimite ainevahetuse kindlakstegemiseks, haiguste diagnostikas ja vähiuuringutes. Rakukultuurikeskkond on loomarakkude kultuuri oluline aspekt. Dulbecco modifitseeritud kotka sööde (DMEM) ja Roswelli pargi mälestusinstituudi sööde (RPMI) on kaks looma rakukultuuris kasutatavat söötet. RPMI on sööde, mida kasutatakse laialdaselt imetajarakkude kultiveerimiseks suspensioonikultuuris. DMEM on modifitseeritud tüüpi põhikeskkond, aminohapete ja vitamiinide kontsentratsiooni suurenemine kuni neljakordne. DMEM-i kasutatakse rakkude kultiveerimisel kleepunud kultuurides. Peamine erinevus kahe meedia vahel on meediakultuuri tüüp. RPMI-d kasutatakse suspensioonikultuurides, samas kui DMEM-d kasutatakse kleepunud rakkude kultiveerimiseks.
SISU
1. Ülevaade ja peamine erinevus
2. Mis on RPMI
3. Mis on DMEM
4. RPMI ja DMEM sarnasused
5. Kõrvuti võrdlus - RPMI vs DMEM tabelina
6. Kokkuvõte
Mis on RPMI?
RPMI-d ehk Roswelli pargi mälestusinstituudi meediumit nimetatakse ka RPMI 1640-ks. Meedia nime tuletas instituut, kus meedia avastati. Seda söötet kasutatakse tavaliselt loomarakkude kultuuris, eriti imetajate rakkude kasvatamiseks. Algselt töötati need välja inimese lümfotsüütide kasvatamiseks.
RPMI sisaldab järgmisi koostisosi.
- Glükoos
- pH indikaator (fenoolpunane)
- Soolad (naatriumkloriid, naatriumvesinikkarbonaat, dinaatriumfosfaat, kaaliumkloriid, magneesiumsulfaat ja kaltsiumnitraat)
- Aminohapped
- Vitamiinid (i-inositool, koliinkloriid, para-aminobensoehape, foolhape, nikotiinamiid, püridoksiinvesinikkloriid, tiamiinvesinikkloriid, kaltsiumpantotenaat, biotiin ja riboflaviin, tsüanokobalamiin)
RPMI eripära on fosfaadi suurenenud kontsentratsioon söötmes. RPMI-d kasutatakse 5% süsinikdioksiidi atmosfääris. See tagab rakkude kasvuks maksimaalsed ja optimaalsed tingimused. Bikarbonaatpuhverdussüsteem hoiab söötme pH tasemel 8,0.
Joonis 01: Rakukultuur Petri tassi peal
RPMI rakendused rakukultuuris
- Inimese T- ja B-lümfotsüütide, luuüdi rakkude ja hübridoomi kasvatamine.
- Kasutatakse inimese neoplastiliste rakkude uurimiseks.
Mis on DMEM?
Dulbecco modifitseeritud kotka sööde (DMEM) on modifitseeritud sööde, mis on kaubanduslikult valmistatud. Keskmise pulbri algne tekstuur on kollane. DMEM-is suureneb vitamiinide kontsentratsioon kuni neli korda, suurendades seeläbi toitainete sisaldust söötmes.
Samuti modifitseeritakse DMEM-i, lisades rohkem soolasid nagu raudnitraat, naatriumpüruvaat ja mõned asendamatud aminohapped nagu seriin ja glütsiin. Samuti muudetakse glükoosi formulatsiooni söötmes. Algne koostis sisaldab 1000 mg / l glükoosi, samas kui DMEM-is suurendatakse kontsentratsiooni kuni 4500 mg / l. DMEM nõuab ka seerumikeskkonna täiendamist, kuna see ei ole täielik sööde. Kõige sagedamini täiendatakse DMEM-i veiste loote seerumiga (FBS). FBS annab kultiveerimiseks vajalikud proteiinid ja kasvufaktorid.
Sööde pH varieerub naatriumvesinikkarbonaadi lisamisel. Sööde pH enne naatriumvesinikkarbonaadi lisamist on umbes 6,80–7,40, samas kui naatriumvesinikkarbonaadi lisamise järel jääb pH vahemikku 7,60–8,20. Keskkonna säilitustemperatuur on 2 - 8 0 C.
Joonis 02: DMEM
DMEM-i rakendused
- Polüomaviiruse naastude moodustumise võime uurimiseks hiire embrüonaalsetes rakkudes.
- Kontakt-pärssimise uuringutes.
- Uurimistöös ja analüüsis kana rakukultuurid.
Millised on RPMI ja DMEM-i sarnasused?
- Loomse rakukultuuris kasutatakse nii RPMI-d kui ka DMEM-i.
- Nii RPMI kui ka DMEM söötmed on vedelad ravimvormid.
- Nii RPMI kui ka DMEM söötmed sisaldavad kasvuks vajalikke asendamatuid aminohappeid, vitamiine ja anorgaanilisi sooli.
- Nii RPMI kui ka DMEM söötmed on puudulikud. Seetõttu tuleks lisada seerumit.
- Nii RPMI kui ka DMEM söötmes kasutatakse süsinikuallikana glükoosi.
- Nii RPMI kui ka DMEM söötmel on kõrgem pH.
Mis vahe on RPMI ja DMEM-i vahel?
Erinev artikkel keskel enne tabelit
RPMI vs DMEM |
|
| RPMI on keskkond, mida kasutatakse laialdaselt imetajarakkude kultiveerimiseks suspensioonikultuuris. | DMEM on modifitseeritud tüüpi põhikeskkond, millel on suurenenud aminohapete ja vitamiinide kontsentratsioon. |
| Ekstrafosfaatide olemasolu | |
| Esitatakse RPMI-s. | DMEM-is puudub. |
| Kasutage | |
|
Harjunud rakkude kultiveerimiseks kleepunud kultuurides. See on harjunud,
|
| Kultuuri tüübid | |
| RPMI-d kasutatakse suspensioonikultuuride jaoks. | DMEM-i kasutatakse rakukultuuris olevate kultuuride jaoks. |
Kokkuvõte - RPMI vs DMEM
Nii RPMI kui ka DMEM-i kasutatakse loomarakkude kultiveerimisel laialdaselt, eriti looma rakuliinide, sealhulgas lümfotsüütide kultiveerimiseks in vitro. DMEM on modifitseeritud põhikeskkond, kus toitainete kontsentratsioon on suurenenud. RPMI, mille on välja töötanud Roswelli pargi mälestusinstituut, ja see on ka söötmeks, mida kasutatakse loomarakkude kasvatamisel, eriti imetajate lümfotsüütide jaoks. Mõlemad kandjad on kaubanduslikult saadaval. See on erinevus RPMI ja DMEM vahel.
